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5%碱性品红乙醇溶液 Basic Fuchsin, 5% in ethanol B1072
  • 品  牌:

    普利莱
  • 货  号:

    B1072
  • 规格ml:

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描述:

二氨基联苯胺(Diaminobenzidine,DAB)是过氧化物酶(POD)的底物,DAB 显色液主要用于免疫过氧化物酶法,适用于辣根过氧化物酶 HRP 标记的免疫印记或免疫组化反应。过氧化物酶使底物发生反应,于反应部位产生棕色沉淀物。免疫印记可直接在膜上显示条带。免疫组化标本显色时间一般为室温 5-20 分钟,随后在显微镜下观察显色情况,显色充分后应将标本及时脱水封固。其终产物可直接在光镜下观察,也可经 OsO4 处理后,增加反应产物的电子密度,用于电镜观察。

规格:

溶液 A: 10ml 溶液 B:10ml

储存:

-20℃避光密闭保存,一年有效。避免反复冻融。短期可 2-8℃保存。

使用说明:

1.对于组织切片或蛋白质印记膜,在与辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗体或其它形式的探针孵育后,用适当洗涤液洗涤 3-5 次,每次 3-5 分钟。

2.取 900ul PBS(或双蒸水),加入 50ul 溶液 A,50ul 溶液 B 混合均匀,即配成 DAB 工作液。

如需要更大体积工作液,可按比例放大。此溶液必须现用现配,配好后避光保存,1 小时内使用,过期后请将剩余的液体废弃。

3.向组织切片或膜上加入适量 DAB 工作液,确保能充分覆盖样品。

4.室温避光孵育 3-10 分钟或更长时间,避免光照,直至显色至预期深浅。

5.去除 DAB 染色工作液,用蒸馏水洗涤 2-3 次即可终止显色反应。

对于组织切片或细胞样品,显色反应终止后,可对其进行其他染料复染。对于膜,显色反应终止后,可以室温晾干避光保存。

注意:

1.DAB 溶液应低温密封保存。如有结晶析出,应确保结晶完全溶解再行使用;

2.显色工作液应现用现配,新鲜配制的工作液应为无色或浅棕色,如颜色过深,请勿使用;

3.显色时间严格控制,根据情况调整,以免显色过度。固相膜显色数小时后即会褪色,不能永久存在;

4.DAB 为可疑致癌物,请采取必要的防范措施。操作时应戴手套,尽量避免与皮肤接触,用后及时彻底冲洗,接触 DAB 的实验用品最好经洗液浸泡 24h 后使用。

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