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改良Lowry法蛋白定量试剂盒 P1509
  • 品  牌:

    普利莱
  • 货  号:

    P1509
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Lowry法蛋白定量试剂盒      P1509

描述:

Lowry法蛋白定量应用Folin-酚试剂法原理如下:在碱性条件下,蛋白质与铜离子作用生成蛋白质-铜络合物,此络合物将Folin试剂还原,生成深蓝色物质,其颜色深浅与蛋白含量成正比,线性范围5~500ug/ml。Lowry法蛋白定量显色反应主要与样本中的酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸含量相关,样品中含有酚类、柠檬酸和巯基化合物等可对反应产生干扰。此外,待测样本也会因酪氨酸、色氨酸含量不同而使显色强度稍有不同。

组成:

(1000次)

Folin 酚 A 100ml×2  室温

Folin 酚 B   5ml       室温

Folin 酚 C   20ml      室温

R1           30ml      室温

BSA蛋白标准品(5mg/ml) 1ml   -20℃

以上试剂按要求温度保存,有效期至少一年。

注意:试剂开封使用后请及时密闭保存,R3试剂颜色变成深绿色即失效。

所需设备

比色计、酶标仪或微板比色仪,最佳工作波长650nm。

操作步骤

1.根据样本量,取适量Folin酚A和B按50:1混合,混合后24小时有效。

2.根据样本量,取适量BSA标准品用R2稀释10倍至浓度0.5mg/ml。

3.将标准品按 0、2、4、6、8、12、16、20ul加到96孔板中,PBS补足至20ul。

4.将样品作适当稀释(最好多做几个梯度),20ul到96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时的误差,标准线前面的点误差比较大,所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。

5.各孔加入配好的Folin酚A+B试剂200ul,混匀,室温静置10分钟。

6.各孔加入20ulFolin酚C试剂,迅速混匀,37℃孵育30分钟。酶标仪测定A650 OD值,绘制标准曲线,计算蛋白浓度。

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