DiI 细胞膜橙色荧光探针 C0022

描述：

DiI即DiIC18(3),全称为 1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'-tetramethylindocarbocyanine perchlorate，是最常用的细胞膜荧光探针之一，呈现橙红色荧光。DiI是一种亲脂性膜染料，进入细胞膜后可以侧向扩散逐渐使整个细胞的细胞膜被染色。DiI在进入细胞膜之前荧光非常弱，仅当进入到细胞膜后才可以被激发出很强的荧光。DiI被激发后可以发出橙红色的荧光，DiI和磷酯双层膜结合后的激发光谱和发射光谱。其中，最大激发波长549nm，最大发射波长为565nm。DiI可以溶解于无水乙醇、DMSO和DMF，溶解度约为1-2.5mg/ml。发现较难溶解时可以适当加热，并用超声处理以促进溶解。用于细胞膜荧光标记时，DiI的常用浓度为1-25μM，最常用的浓度为5-10μM。DiI可以直接染色活的细胞或组织，染色时间通常为5-20分钟。对于固定的细胞或组织，通常宜使用配制在PBS中的4%多聚甲醛进行固定,使用其它不适当的固定液会导致荧光背景较高。

规格：10mg

保存：-20℃干燥避光保存，有效期一年。

使用方法：

I 细胞膜染色液制备

(1) 配置DMSO或EtOH储存液：储存液用DMSO或EtOH配置浓度1～5mM。

(2) 注意：未使用的储存液保存在-20℃，避免反复冻融。

(3) 工作液制备：用合适的缓冲液(如：无血清培养基，HBSS或PBS)稀释储存液，配制浓度为1～5µM的工作液。

注意：工作液的最终浓度是根据不同细胞和实验的经验来配制。可以从推荐浓度的十倍以上寻找最佳条件。

2. 悬浮细胞染色

(1) 悬浮细胞密度为1×106/mL加入到工作液中。

(2) 在37℃培养细胞2～20分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。

(3) 染色细胞试管在1000～1500转离心5分钟。

(4) 倾倒上清液，再次缓慢加入预温37℃的培养液。

(5) 重复(3)，(4)步骤两次以上。

3. 粘壁细胞的染色

(1) 使粘壁的细胞在无菌实验室培养。

(2) 从培养基中移走盖玻片，吸走过量培养液，将盖玻片放在潮湿的环境中。