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膜再生液(抗体去除液、抗体剥离液,酸性) P1651提供OEM服务,大包装更优惠!
  • 品  牌:

    普利莱
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    P1651-100
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膜再生液(抗体去除液、抗体剥离液,酸性) P1651

描述:

膜再生液,也称做抗体剥离液体、一抗二抗去除液。允许对同一张膜进行多次Western Blot检测。在室温条件下,将用过的膜浸泡在膜再生液中30分钟,能够选择性清除与膜抗原结合的第一抗体及第二抗体,但不影响电转移到膜上的蛋白。随后可以使用不同的抗体进行下一轮Western Blot实验,可利用同一张膜进行多次蛋白检测。不仅适宜用少量样品多次检测多种不同蛋白,即使样品量并不匮乏,采用这种多次检测同一张膜上的蛋白的策略,能省去给药处理、蛋白电泳和膜转移等耗费性步骤。

特点:

1)无毒无味无害,室温保存和使用;

2)可对同一张膜进行10次以上的Western Blot检测。

适用:

硝酸纤维素膜或PVDF膜。使用前膜可以保存在PBSTBS缓冲液,也可以室温干燥保存数月。干的PVDF膜应该先用甲醇泡5分钟。

安全性:

无毒无味。按照普通化学品安全规范进行操作和处置。

储存:

室温保存,一年有效。温度过低可能出现浑浊。

操作步骤:

1. 将膜充分浸泡于适当体积的再生液中,室温孵育15~30分钟并不时晃动。孵育时间的长短应参考后面的说明进行优化。洗脱某些抗体需要较长的时

间如30~60分钟。

2. 用镊子取出膜,用自备Western Blot洗涤缓冲液或普利莱封闭洗涤缓冲液(B1009)淋洗膜一次,再洗膜5分钟。

3. 此时膜上抗体已去除,膜已再生。用脱脂奶粉或BSA封闭,进行下一轮Western Blot实验。

说明:

1. 膜再生或Stripping的实质是在不影响膜上结合的抗原的条件下,将与抗原分子结合的一抗和二抗洗脱下来。有许多因素影响抗体从膜上的洗脱,

如膜的类型、抗体类型和浓

度及其与抗原结合特性等。按下面的说明优化再生液中孵育膜的时间至关重要。

2. 确定膜上抗体是否去除与优化再生液中孵育膜的时间:用ECL工作液孵育再生后的膜约1分钟,然后进行X光胶片曝光并显影,可确定膜上的抗体是

否完全去除。如显示条

带,表明抗体未完全去除,应继续将膜浸泡在再生液中孵育30~60分钟。然后再次ECL 检查膜上抗体是否去除。重复此步骤直到抗体完全去除并确定最

佳孵育时间。

3. 由于至今尚不清楚的原因,使用脱脂奶粉封闭的膜要比使用BSA封闭的膜上的抗体更容易被Strip下来。因此准备进行Strip的膜,应该使用脱脂奶

粉而不是BSA封闭。

4. 尽量避免使用干燥保存的膜,因为干的膜上的抗体很难被Strip干净

部分使用普利莱膜再生液发表的SCI文章,供参考:

1、 Zhao X, Gao M, He J, et al. Perilipin1 Deficiency in Whole Body or Bone Marrow-Derived Cells Attenuates Lesions in Atherosclerosis-Prone Mice[J]. PloS one, 2015, 10(4).

2、 Deng J, Liu S, Zou L, et al. Lipolysis response to endoplasmic reticulum stress in adipose cells[J]. Journal of Biological Chemistry, 2012, 287(9): 6240-6249.

3、 Wang J Y, Xia Q, Chu K T, et al. Severe global cerebral ischemia-induced programmed necrosis of hippocampal CA1 neurons in rat is prevented by 3-methyladenine: a widely used inhibitor of autophagy[J]. Journal of Neuropathology & Experimental Neurology, 2011, 70(4): 314-322.

4、 Jia C, Zhu W, Ren S, et al. Comparison of genome-wide gene expression in suture-and alkali burn-induced murine corneal neovascularization[J]. Molecular vision, 2011, 17: 2386.

5、  Huang M, Liu X, Du Q, et al. Inhibitory effects of sunitinib on ovalbumin-induced chronic experimental asthma in mice[J]. Chin Med J (Engl), 2009, 122(9): 1061-1066.

6、 Zhang T, He J, Xu C, et al. Mechanisms of metformin inhibiting lipolytic response to isoproterenol in primary rat adipocytes[J]. Journal of molecular endocrinology, 2009, 42(1): 57-66.

7、 Zhang G R, Cheng X R, Zhou W X, et al. Age-related expression of calcium/calmodulin-dependent protein kinase II A in the hippocampus and cerebral cortex of senescence accelerated mouse prone/8 mice is modulated by anti–Alzheimer's disease drugs[J]. Neuroscience, 2009, 159(1): 308-315.

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