产品描述:
细胞贴壁粘附剂即贴壁得®,是一种新型多聚阳离子化合物的200-500倍浓缩液,溶于过滤除菌的PBS pH7.4,是多聚赖氨酸和胶原蛋白的升级换代产品。用贴壁得®处理组织细胞培养瓶皿或载玻片,可显著增加瓶皿对难贴壁原代或传代培养细胞的粘附能力,增加细胞粘性和数量,效果优于多聚赖氨酸和胶原蛋白,且价格低廉,无细胞毒性,且对大多细胞类型均有明显效果,不影响后续免疫荧光组化和酶学测定等实验,适用于各种原代细胞,如乳鼠脑神经元,易漂浮的传代细胞,如PC12和HEK293细胞,也适用于药物处理易漂浮细胞;使用贴壁得®处理细胞培养平皿,不仅能明显改善细胞生长状态、增加细胞数量,还可以使细胞容易耐受洗涤、换液、药物处理造成的脱落。对于生长在处理过的瓶皿中的细胞,使用细胞贴壁粘附剂可使细胞的转染效率显著增加2-5倍。
产品用途和特点:
1. 用于处理培养皿和培养瓶,显著增加原代或传代培养细胞的粘附贴壁能力
2. 用于处理载玻片,提高玻片粘性,用于悬浮细胞免疫荧光等实验
3. 增强细胞在培养中对换液、药物处理导致脱落的耐受能力
4. 无细胞毒性,不影响后续免疫荧光和酶学测定等实验
5. 操作简单且对大多细胞类型均有明显效果
6. 明显改善细胞生长状态、增加细胞数量,提升转染效率
产品组成:
产品名称 | 规格 | 储存和效期 |
细胞贴壁粘附剂200-500x | 1ml | 常温运输,2-8ºC保存,一年有效 |
操作步骤:
1. 工作溶液制备:将细胞贴壁粘附剂以1:200-1:500比例稀释于灭菌纯水或生理盐水(0.9% NaCl)或0.01M PBS(B1201)缓冲液中,制备成工作溶液;
注意:不同细胞对贴壁粘附剂的敏感度不同,通常粘附剂处理后的器皿培养细胞形态及生长状态均应正常,如果细胞比较敏感,选用高浓度的细胞贴壁粘附剂会使细胞过度粘着,不容易消化掉,有可能出现细胞褶皱、伪足伸出不畅或细胞移动分散不佳等现象,此时应将其继续稀释,避免出现以上情况;如果使用粘附剂后,细胞仍漂浮,贴壁欠佳,应提高粘附剂的使用浓度;
2. 加入新鲜工作液使其完全覆盖培养瓶皿表面。室温(20ºC-25ºC)或37ºC孵育30min,偶尔摇动;
3. 完全弃去瓶皿中的液体。可用灭菌蒸馏水或灭菌生理盐水或0.01M PBS缓冲液等洗涤瓶皿一次,但也可不洗涤而尽量甩干后直接铺种细胞;(注意:切勿烘干用粘附剂处理过的孔板)
4. 甩干瓶皿即可用于铺种细胞等后续实验。
产品说明:
1. 铺种细胞后,一般情况下,细胞贴壁时间需6小时以上,最好过夜;
2. 使用本品后,某些类型的细胞如果贴壁过紧,消化时可加大胰酶用量或延长消化时间;
3. 细胞粘附剂工作液不建议重复处理培养瓶皿;
4. 该试剂安全无毒,仅用于科研。
附表:各种瓶皿需要细胞贴壁粘附剂的量
培养皿/瓶 | 面积(cm2) | 需用粘附剂(µl) | 稀释后的体积 (µl) | 可处理的孔或瓶皿总数 |
96-well 培养板 | 0.3 /well | 0.2 µl | 40 µl | 5000 孔 |
24-well 培养板 | 2 /well | 0. 5 µl | 100 µl | 2000 孔 |
12-well 培养板 | 4 /well | 1 µl | 200 µl | 1000 孔 |
6-well 培养板 | 10 /well | 2.5 µl | 500 µl | 500 孔 |
35-mm 培养皿 10 cm2 培养瓶 | 10 /dish or flask | 2.5 µl | 500 µl | 500 瓶皿 |
60-mm 培养皿 25 cm2 培养瓶 | 25 /dish or flask | 5 µl | 1 ml | 200 瓶皿 |
10-cm 培养皿 75 cm2 培养瓶 | 75 /dish or flask | 10 µl | 2 ml | 100 瓶皿 |
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