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膜再生液(抗体去除液、抗体剥离液) 温和型 P1650

品牌名:普利莱

货号:P1650

规格:
价格:120-120
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产品描述:膜再生液也称抗体剥离液、一抗二抗去除液。允许对同一张膜进行多次Western Blot检测。膜再生液温和型 酸性)作用温和,室温下,将用过的膜浸泡在膜再生液中30分钟,即可选择性清除与膜上抗原结合一抗和二抗,但不影响转移到膜上的蛋白。随后可以使用不同的抗体进行下一轮Western Blot实验。省去给药处理、蛋白电泳和膜转移等步骤,提高实验效率,节省实验时间。

产品特点:

作用温和:不影响抗原蛋白,可对同一张膜进行3次以上的Western Blot检测

操作便捷:无需重复电泳转膜,无需特殊设备

保存方便:室温保存和操作

安全性高:无毒无害,无刺激性气味

兼容性广:适用于PVDF膜和NC

产品适用:硝酸纤维素膜或PVDF膜。使用前膜可以保存在PBSTBS缓冲液。

产品组成 

产品名称

规格

储存和效期

膜再生液

(温和型 酸性)

100ml

常温保存一年有效

500ml

操作步骤:

1. NC膜或PVDF充分浸泡于适当体积的膜再生液中,室温25ºC±3ºC孵育15~30分钟并不时晃动。孵育时间可参考步骤4进行优化;

2. 用镊子取出膜,用TBSTB1009)淋洗膜一次,淋洗残留的膜再生液;

3. TBST浸泡洗膜,室温(25ºC±3ºC)孵育5分钟

4. 确定膜上抗体是否去除与优化再生液中孵育膜的时间:用ECLP1050)工作液孵育再生后的膜约1分钟,然后进行显影,可确定膜上的抗体是否完全去除。如显示条带,表明抗体未完全去除,应继续将膜浸泡在再生液中孵育30~90分钟。然后再次ECL 检查膜上抗体是否去除。重复此步骤直到抗体完全去除并确定最佳孵育时间;

5. 用脱脂奶粉(P1622)封闭,进行下一轮Western Blot实验。

常见问题解决方案:

1. 膜再生或Stripping的实质是在不影响膜上结合的抗原的条件下,将与抗原分子结合的一抗和二抗洗脱下来。有许多因素影响抗体从膜上的洗脱,如膜的类型、抗体类型和浓度及其与抗原结合特性等。需在操作过程中优化膜再生液孵育膜的时间;

2. 冬季室内温度较低时,建议增加孵育时间,以达到最佳再生效果;

3. 本品为温和型膜再生液,当某些抗原和抗体结合力较强时,即使增加孵育时间(超过4小时)也无法洗脱,建议使用加强型膜再生液(P1652)进行膜再生

4. PVDF膜浸泡在膜再生液中,膜是否透明不影响膜再生效果

5. 由于至今尚不清楚的原因,使用脱脂奶粉封闭的膜要比使用BSA封闭的膜上的抗体更容易被Strip下来;因此准备进行Strip的膜,应该使用脱脂奶粉而不是BSA封闭;

6. 尽量避免使用干燥保存的膜,因为干的膜上的抗体很难被Strip干净

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