产品描述: 

磁珠法高分子量DNA片段分选纯化回收试剂是AMD公司开发制备的新产品。主要是针对高分子量基因组DNA（HMW DNA）的纯化和大小选择。用于快速去除HMW DNA样品中的小片段DNA， 工作适用范围是5kb至100kb或以上。 使用操作和NGS文库DNA片断分选过程类似，只需调整试剂与样本的体积比，即可从高分子量 DNA 样本中快速去除长度 <5kb、<10kb、<20kb 或 <30kb 的 DNA 片段至痕量水平，同时可回收所需的大尺寸 DNA 片段：>5kb、>10kb、>20kb 或 >30kb。满足第三代测序平台对 DNA 样本的要求。适用于如PacBio SMRT Technology 或Oxford Nanopore Technology.的测序平台。是一款全新且真正可实现对高分子量基因组DNA（HMW DNA）的纯化和大小选择的产品。按照该产品常规操作规程，每个检测需要约65-75微升试剂。

产品组份和性状：

为黑褐色磁颗粒悬液。磁珠分散均匀，具有超顺磁性。磁相应时间<20s。 批次间差异小于5%，重复性好，稳定性好。

应用领域：

可用于5kb至200kb范围高分子量DNA的分段选择，回收和纯化。

储存条件: 

2-8℃ 保存。  切勿冷冻。

注意事项： 

该产品仅适用于科学研究，请勿用于人体实验。

常见问题及回答：

Q: 什么是高分子量DNA片段分选？

A: 高分子量DNA 片段大小选择是针对大于5kb以上的高分子量基因组DNA（HMW DNA）的纯化和大小选择。适用于如PacBio SMRT Technology 或Oxford Nanopore Technology.的测序平台。

Q：Auto-Mag® HMW Size Select（磁珠法高分子量DNA片段分选纯化回收试剂）工作原理是什么？

A：是基于固相可逆固定化（SPRI (Solid Phase Reverse Immobilization)）的原理，配合特定的缓冲液，选择性地将高分子量核酸与顺磁珠结合。去除HMW DNA样品中的小片段DNA，从而实现纯化回收特定范围大小的高分子量DNA。， 工作适用范围是5kb至100kb或以上。

Q: 高分子量DNA片段分选纯化回收试剂工作流程？

A: 主要分有4步：

1.混合：将高分子量DNA片段分选纯化回收试剂与 gDNA 样本混合。

2.结合：与样本混合时，高分子量DNA片段分选纯化回收试剂的纳米磁珠会与所需的 DNA片段结合。这种相互作用依赖于高分子量DNA片段分选纯化回收试剂中的化学成分的浓度比例，高分子DNA分子与磁珠纳米粒子表面之间的多种因素，例如电荷-电荷相互作用、亲水/疏水相互作用和其他分子间的引力。

3.清洗：磁珠对磁场作出反应（通过使用磁铁，例如磁分离架），使结合的DNA能够快速有效地与样本的其余部分分离。通过抽吸去除未结合的材料，剩下的是磁珠纳米粒子结合的DNA。

4.洗脱：从纳米磁珠粒子中释放结合的核酸片段。选定的 DNA 样本已准备好用于下游应用。

Q：Auto-Mag® HMW Size Select分选试剂的主要用途是什么？

A：主要应用于第三代高通量测序高分子量DNA片段的纯化和分选。去样品中除短 DNA 片段、杂质和不需要的反应成分。

Q：磁珠法高分子量DNA片段分选纯化回收试剂可以重复使用吗？

A：不可以重复使用。

Q：磁珠法高分子量DNA片段分选纯化回收试剂可以纯化基因组 DNA （gDNA）吗？

A: 磁珠法高分子量DNA片段分选纯化回收试剂就是专门为高分子量基因组DNA片段分选设计的。可以进行高分子量DNA片段产物的纯化。并可根据加入的试剂于DNA样品体积的比例变化，纯化回收不同大小范围的DNA片段。例如：1.5×磁珠可以吸附 大于5kb 以上的高分子量DNA，清除掉小于5kb的DNA片段。1.35×磁珠可以吸附 20 bp 以上的DNA产物，而清除小于20kb的DNA片段，等等。详细请参考Auto-Mag® HMW Size Select分选试剂操作手册。

Q：磁珠法高分子量DNA片段分选纯化回收试剂回收DNA大小偏差的可能的原因是什么？

A: 常见原因包括：

1）操作误差。高分子量DNA分选试剂对于试剂和样品之间的混合比例十分敏感。操作时应确定加样器的准确性。

2）磁珠和样品比例不对。请按照说明书进行选择合适的比例。

3）磁珠与DNA混匀不充分，未能充分吸附。需充分混匀反应体系。

4）吸附孵育时间偏短。，请保证孵育时间至少10 分钟。

5）磁珠丢失。磁珠分选时，丢弃上清或用乙醇洗涤磁珠时触及到了磁珠，导致部分磁珠随吸弃液体时被丢弃。请在移液过程中防止吸到磁。；

6）洗涤用的乙醇浓度偏低。建议洗涤用乙醇浓度不低于80%。

7）磁珠干燥过度。磁珠长时间干燥导致DNA难以正常洗脱，得率降低；建议干燥时间不宜过长。

8）洗脱液体积不足。使用合适体积的洗脱液，洗脱液应可完全覆盖管内磁珠团块。

Q. 磁珠法高分子量DNA片段分选纯化回收试剂的DNA结合能力多少？

A: 大于40ug/mg 

Q：磁珠法高分子量DNA片段分选纯化回收试剂是否可以用于提取gDNA？

A：不可以。

Q: 磁珠法高分子量DNA片段分选纯化回收试剂在室温下放置了很长时间。还能使用吗？

A: 该试剂在室温下稳定。但长期保存，仍建议放4-8oC保存。详细请参阅操作手册。

Q: Auto-Mag® HMW Size Select（磁珠法高分子量DNA片段分选纯化回收试剂）市场定位？

A: Auto-Mag® HMW Size Select Kit 可用于多种高分子量DNA样本类型，在文库制备之前去除短 DNA 片段，从而提高 DNA 样本质量，并显著增强第三代测序平台（如 PacBio SMRT 技术或 Oxford Nanopore 技术）的平均读取长度。