产品描述:
Super ECL Plus超敏发光系统基于高效的电化学发光ECL技术,采用鲁米诺(Luminol)-过氧化氢(H2O2)-辣根过氧化物酶(HRP)反应体系,适用于常规Western Blot化学发光检测。为增强发光强度与稳定性,本产品中特别添加了化学发光增强剂和稳定剂,级联放大光信号,可检测低至皮克到飞克级微量蛋白。相比于普通ECL发光液(P1010),其信号值至少增强10倍,可大大节省宝贵的样本和抗体用量。
产品特点:
灵敏度高:优化的增强型配方,可检测极低丰度的目标蛋白,轻松应对珍贵样本或弱表达蛋白的检测
线性范围宽:信号强度与目标蛋白含量在多个数量级内呈现良好线性关系,便于进行准确的半定量分析,确保数据的可靠性
信噪比卓越:精选的反应底物与优化的缓冲体系,可有效抑制非特异性背景发光,获得清晰锐利的条带,降低了假阳性干扰
稳定性出色:A、B两液分装设计,可有效隔离关键组分,确保工作液在室温下具有较长的稳定时间,便于多次曝光与最优结果的捕获
兼容性广泛:适用于PVDF膜和NC膜,与市面上绝大多数HRP标记的二抗均可完美配合使用,操作流程简便、快速
应用效果展示:

普利莱ECL化学发光检测试剂选择参照:
目前,普利莱有多种不同灵敏度的ECL发光检测试剂。常规Western Blot检测,优先推荐使用Super ECL Plus超敏发光液(P1050)。对于表达量较高的目标蛋白检测,例如内参等,推荐使用性价比更高的ECL超敏发光液(P1010)。对于低丰度难检测的目标蛋白,优先推荐使用灵敏度最高的飞克级ECL极敏发光液(P1060)。但如果目标蛋白丰度适中,不太推荐使用飞克级ECL极敏发光液,因其灵敏度特别高,容易产生过曝“烧膜”现象。
产品名称 | ECL超敏发光液 | Super ECL Plus超敏发光液 | 飞克级ECL极敏发光液 |
货号 | P1010 | P1050 | P1060 |
目标蛋白检测下限 | 纳克级 | 皮克级 | 飞克级 |
特点 | 信号稳定,线性关系好 | 适用性广、灵敏度高、兼容性强,节省抗体 | 灵敏度极高,线性范围宽 |
适用性 | 表达丰度较高的目标蛋白如内参 | 各类中等丰度的胞浆、胞核或膜蛋白等 | 低丰度蛋白、抗体效价低或微量珍贵样本 |
不同发光液应用效果对比:

产品组成:
组分 | 25ml | 100ml | 250ml | 500ml | 储存和效期 |
Super ECL Plus超敏发光液 A液 | 12.5ml | 50ml | 125ml | 250ml | 2-8ºC避光保存,两年有效 |
Super ECL Plus超敏发光液 B液 | 12.5ml | 50ml | 125ml | 250ml | 2-8ºC保存,两年有效 |
温馨提示:100ml规格可用于1000cm2转印膜的化学发光
使用方法:
1.Super ECL Plus超敏发光工作液配制:分别取等体积适量的A液和B液混匀后,室温放置(0.1ml发光工作液/cm2),工作液现用现配;
2.用镊子(TB6280)取出膜,搭在滤纸上沥去多余洗液,保持膜处于湿润状态,然后置于曝光专用膜(TB6343)或干净的保鲜膜上;
3.在膜上均匀滴加化学发光工作液,反应1-2min,避免产生气泡;
4.用镊子夹膜,搭在滤纸上沥去多余发光工作液;
5.全自动化学发光成像系统扫描或X光片曝光,请根据发光强度调整曝光时间;
6.使用过的膜也可进行抗体剥离(P1650或P1652)进行多次杂交显影。
注意事项:
1.ECL A液和B液使用过程中务必更换枪头,避免交叉污染,影响使用效果;
2.步骤1-4可在日光灯下操作,但需避免发光液曝露于强光下,使其灵敏度降低;
3.实验中,请佩戴手套且使用干净镊子等洁净器材,避免外源蛋白及金属离子污染;
4.各溶液使用后,请盖紧瓶盖避光保存,以防失效;
5.暗室曝光时,使用肉眼可见的荧光-放射自显影曝光标签(P2010)可帮助确定胶片上条带的准确位置和大小;
6.NaN3能抑制HRP活性,回收二抗应避免使用NaN3,如必需使用勿超过0.01%;
7.本产品仅限专业人员用于科学研究,不得用于临床诊断或治疗。
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AP0001 | |
ECL化学发光检测常见问题可能原因和解决方案
常见问题 | 可能原因 | 解决方法 |
信号弱 | 一抗、二抗使用浓度偏低 | 提高一抗、二抗使用浓度 |
蛋白丰度低 | 增加上样体积 | |
换用灵敏度更高的ECL化学发光试剂盒 | ||
高背景(背景较高或无特 异性条带) | 一抗、二抗稀释没有使用正确的缓冲液和浓度 | 适当降低稀释比,降低一抗、二抗的浓度 |
封闭液使用不正确或封闭不充分 | 磷酸化蛋白检测务必使用BSA或无蛋白封闭液封闭;膜孔径越小,封闭及洗脱时间应越长 | |
一抗孵育不充分 | 适当延长孵育时间(4℃孵育过夜) | |
荧光迅速猝灭,出现空心条带 | 目的条带荧光过强,快速消耗发光底物,底物消耗完之后就会出现反白的情况 | 降低蛋白上样量或一抗、二抗的用量 |
膜上出现棕色或黄色条带 | 目标区域HRP酶含量过于丰富,产生大量自由基,致使HRP酶氧化失活 | 降低蛋白上样量或一抗、二抗的用量 |
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